miR-145和PTEN/AKT/mTOR通路在砷致大鼠流产及滋养层细胞损害中的作用

来源：环境与职业医学杂志 2022年第3期北京时间：

作者：彭涛, 梅雪峰, 李翔,

摘要：背景 砷染毒可损害滋养层细胞进而诱导流产，但其机制尚不清楚。 目的 探讨miR-145和PTEN/AKT/mTOR通路在砷致孕鼠流产及滋养层细胞损害中的作用。 方法 动物实验：SD孕鼠20只，随机分为正常对照组（生理盐水灌胃）、砷染毒流产组（10.65 mg·kg−1亚砷酸钠溶液灌胃，灌胃体积10 mL·kg−1），每组10只；砷染毒流产组出现流产后（染毒5~6 d），收集两组胎盘组织，实时定量PCR（RT-PCR）检测微小RNA-145（miR-145）、磷酸酶和张力蛋白同源物（PTEN）、蛋白激酶B（AKT）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）mRNA的表达水平，蛋白印迹法检测PTEN、AKT、mTOR、p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平。细胞实验：将永生化人滋养层细胞系（HTR-8/SVNEO细胞）分为对照组、砷染毒组、miR-145过表达组、砷染毒+miR-145过表达组，各组细胞密度为5×105个·孔−1，砷染毒剂量为20 μmol·L−1，培养环境为37 °C、5%CO2，处理72 h，MTT法检测细胞存活率，结晶紫染色法检测单克隆形成数目，流式细胞法检测凋亡水平，Image J Angiogenesis Analyzer 1.8.0插件测定细胞总血管长度和总血管数目；基因和蛋白的检测指标和方法同“动物实验”。 结果 （1）动物实验：与正常对照组比较，砷染毒流产组胎盘组织miR-145表达水平升高（PPTEN、AKT、mTOR mRNA及其蛋白和p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平降低（PPPmiR-145 mRNA表达水平升高（PPTEN、AKT、mTOR mRNA及其蛋白和p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平降低（PmiR-145 mRNA表达水平升高（PPTEN、AKT、mTOR mRNA及其蛋白和p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平降低（P 结论 miR-145可能与砷染毒所致流产有关，miR-145可抑制滋养层细胞HTR-8/SVNEO增殖、血管形成，促进其凋亡，其机制可能与PTEN/AKT/mTOR通路的抑制有关。

关键词：微小RNA-145, 磷酸酶和张力蛋白同源物, 蛋白激酶B, 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白, 砷, 流产, 滋养层细胞,