枸杞多糖对2,4-二氯苯氧乙酸所致雌性大鼠生殖系统损伤的保护作用

来源：环境与职业医学杂志 2021年第11期北京时间：

作者：王恒泉, 柴茹, 周健, 杨惠芳,

摘要：背景2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）作为阔叶杂草除草剂和植物生长调节剂而被广泛应用，相关研究显示2,4-D具有神经毒性、内分泌干扰性、遗传毒性与致癌性以及生殖毒性等。目的了解2,4-D暴露对雌性大鼠生殖系统的影响，初步探讨枸杞多糖（LBP）的保护作用及可能机制。方法SPF级雌性SD大鼠24只，每组6只，随机分为空白对照组（去离子水1 mL·d−1）、染毒组（75 mg·kg−1 2,4-D）、枸杞多糖对照组（50 mg·kg−1 LBP）、枸杞多糖干预组（75 mg·kg−1 2,4-D + 50 mg·kg−1 LBP）。每天经口灌胃1次，连续染毒28d。每隔2d测量体重1次，染毒结束后取卵巢及子宫组织称重并计算脏器系数；采用苏木精-伊红染色法（HE）检测卵巢及子宫组织病理改变；采用ELISA法检测血清中雌二醇（E2）水平；使用相关试剂盒测定血清中氧化损伤 超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）及丙二醛（MDA）水平；TUNEL荧光染色法检测卵巢及子宫组织细胞凋亡情况；Western blotting法检测卵巢组织中死亡受体通路相关蛋白Fas、FasL、FADD、Pro-Caspase-8、Cleaved-Caspase-8、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3表达量。结果与空白对照组相比，染毒组大鼠卵巢组织结构异常，处于不同发育阶段的卵泡数量减少，形态出现改变，且闭锁卵泡数量增多；子宫内膜不完整，可见内膜缺失，出现不同程度的胞核假复层现象，固有层腺体数减少。与染毒组相比，枸杞多糖干预组大鼠卵巢组织结构相对较完整，处于不同发育阶段的卵泡数量增加，结构相对完整，排列紧密；子宫组织结构相对较完整，内膜缺失现象及胞核假复层现象减少。各组间SOD、GSH-Px、E2水平，MDA浓度差异均有统计学意义（F=86.1、26.2、43.3、22.3，均P<0.01）。与空白对照组相比，染毒组血清SOD、GSH-Px、E2水平降低（P＜0.01），MDA浓度增加（P＜0.01）；与染毒组相比，枸杞多糖干预组血清SOD、GSH-Px、E2水平升高（P＜0.01），MDA浓度降低（P＜0.01）。各组间卵巢及子宫组织细胞凋亡率差异均有统计学意义（F=64.8、55.5，均P<0.01）。与空白对照组相比，染毒组大鼠卵巢及子宫组织细胞凋亡率升高（P＜0.01）；与染毒组相比，枸杞多糖干预组大鼠卵巢及子宫组织细胞凋亡率降低（P＜0.01）。各组间卵巢组织内死亡受体通路相关蛋白表达差异均有统计学意义（均P<0.05）。与空白对照组相比，染毒组大鼠卵巢组织内Fas、FasL、FADD、Pro-Caspase-8、Cleaved-Caspase-8、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3表达升高（P<0.05或0.01）；与染毒组相比，枸杞多糖干预组大鼠卵巢组织内Fas、FasL、FADD、Pro-Caspase-8、Cleaved-Caspase-8、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3表达降低（P<0.05或0.01）。结论2,4-D能够引起雌性大鼠发生氧化应激进一步介导Fas-FasL通路引发细胞凋亡而造成雌性大鼠生殖系统损伤。枸杞多糖能降低雌性大鼠氧化应激水平，下调Fas-FasL通路相关蛋白表达，减少生殖细胞凋亡，以达到生殖保护的目的。

关键词：2,4-二氯苯氧乙酸, 生殖毒性, 氧化损伤, 细胞凋亡, 死亡受体途径, 枸杞多糖,