哺乳期双酚A暴露致小鼠睾丸生精细胞减数分裂阻滞的机制研究

来源：环境与职业医学杂志 2021年第7期北京时间：

作者：黄晓迪, 凌远超, 赵程, 陈建美, 张金枝, 刘雅楠, 解美娜,

摘要：背景双酚A（BPA）作为环境内分泌干扰物的一种，能够干扰生精细胞减数分裂进程，进而影响睾丸发育和精子发生，但其影响生精细胞减数分裂的机制仍不清楚。目的探讨哺乳期小鼠BPA暴露对睾丸内调控生精细胞减数分裂和细胞周期相关因子表达的影响。方法新生ICR雄性仔鼠随机分为3组：对照组（玉米油）、BPA低剂量组（0.1 mg·kg-1）、BPA高剂量组（5 mg·kg-1），每组10只。仔鼠于出生后第1天（PND1）开始每天颈背部皮下注射药物持续到PND21断奶。PND22颈椎脱臼处死小鼠后记录小鼠体重，剥取睾丸并称取睾丸重量。流式细胞术DNA倍体分析法检测哺乳期BPA暴露对睾丸生精细胞DNA含量的影响。Western blotting检测睾丸中细胞周期相关蛋白Cdc25A、Cdc25C、Wee1、p-Tyr15 Cdc2、CDK1表达量的变化情况，RT-PCR检测睾丸中细胞周期相关基因Cdc25A、Cdc25C、Wee1、CDK1mRNA水平的变化。结果BPA低、高剂量组小鼠体重、睾丸重量及睾丸系数与对照组的差异无统计学意义（均P > 0.05）。流式细胞术分析结果显示：低、高剂量组二倍体细胞所占比例分别为（25.05±1.62）%、（25.25±6.67）%，较对照组（49.33±6.91）%减少（均P < 0.01）；低、高剂量组四倍体细胞所占比例分别为（45.89±1.95）%、（51.11±8.89）%，较对照组（24.72±6.44）%增多（均P < 0.01）；低、高剂量组间单倍体细胞和S期细胞所占比例与对照组相比，差异无统计学意义（均P > 0.05）。Western blotting结果显示：与对照组相比，BPA高、低剂量染毒组睾丸组织Cdc25A、Cdc25C、Wee1、p-Tyr15 Cdc2蛋白表达水平均降低（均P < 0.05）；CDK1蛋白表达无明显变化（P > 0.05）。RT-PCR结果显示：与对照组相比，BPA染毒组睾丸组织Cdc25A、Cdc25C、Wee1、CDK1的mRNA表达水平差异均无统计学意义（均P > 0.05）。结论哺乳期BPA暴露能够改变小鼠睾丸内生精细胞的周期分布。BPA可能通过下调细胞周期调控因子Cdc25A、Cdc25C、Wee1的翻译水平使初级精母细胞减数分裂发生阻滞，从而干扰了生精细胞分化进程。

关键词：双酚A, 减数分裂, Cdc25, Wee1, p-Tyr15 Cdc2,