长链非编码RNA-GK3P在食管癌中的表达及其对癌细胞生物学功能的影响

来源：环境与职业医学杂志 2021年第7期北京时间：

作者：周静静, 顾云, 张龙, 张颖, 赵超, 陆强, 张虎, 浦跃朴, 尹立红,

摘要：背景甘油激酶3假基因（GK3P）是位于人类染色体4q32.3区域的长链非编码RNA（lncRNA），其亲本基因甘油激酶基因与肿瘤发展有关。然而，lncRNA-GK3P在食管癌中的表达与作用机制尚不清楚。目的分析lncRNA-GK3P在食管癌组织、癌细胞中的表达情况，并探讨其对食管癌EC109细胞增殖、周期、凋亡的影响及机制。方法应用实时定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）技术检测lncRNA-GK3P在食管癌细胞（EC109）与永生化正常食管上皮细胞（Het-1A）以及41例食管癌组织与癌旁组织中的表达情况；采用siRNA敲低技术、质粒转染技术分别构建lncRNA-GK3P敲低和过表达的EC109细胞株，并将其分为4组：si-GK3P组（siRNA GK3P转染）、si-NC组（siRNA GK3P的空载体对照）、plasmid-GK3P组（GK3P过表达质粒转染）、plasmid-NC组（GK3P空载质粒对照）；CCK-8法检测细胞活性、EdU法检测细胞的增殖；流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期，Western blotting测定细胞周期和凋亡相关蛋白Cyclin E1、Cyclin B1、Bcl2和Bax的表达变化。结果与癌旁组织相比，lncRNA-GK3P在食管癌组织中表达水平为前者的（2.91±0.61）倍（t=19.38，P < 0.05）；且相对于食管上皮细胞Het-1A，lncRNA-GK3P在食管癌EC109细胞中表达水平为前者的（3.15±0.27）倍（t=13.06，P < 0.05）。lncRNA-GK3P敲低后，细胞增殖受到抑制si-GK3P组vs si-NC组，（27.21±1.11）% vs（37.95±0.93）%，P < 0.05；细胞G0/G1期比例增加（P < 0.05），S期比例增加（P < 0.05），G2/M期比例减少（P < 0.05）；细胞凋亡增加si-GK3P组vs si-NC组，（10.19±0.91）% vs（7.46±0.18）%，P < 0.05；Cyclin E1、Cyclin B1、Bcl2表达下调，Bax表达上调。lncRNA-GK3P过表达后，细胞增殖增加plasmid-GK3P组vs plasmid-NC组，（37.00±1.71）% vs（29.63±1.45）%，P < 0.05；细胞G0/G1期比例减少（P < 0.05），S期比例增加（P < 0.05），G2/M期比例减少（P < 0.05）；细胞凋亡下降plasmid-GK3P组vs plasmid-NC组，（5.27±0.07）% vs（9.71±0.19）%，P < 0.05；Cyclin E1、Cyclin B1、Bcl2表达上调，Bax表达下调。结论lncRNA-GK3P在食管癌中高表达，通过调控Cyclin E1、Cyclin B1、Bcl2及Bax的表达，在食管癌EC109细胞中发挥促进细胞增殖、抑制凋亡的作用。

关键词：食管癌, 长链非编码RNA, 甘油激酶3假基因, 增殖, 凋亡, 细胞周期,