氟咯草酮对肝细胞BRL-3A的毒性作用

来源：环境与职业医学杂志 2021年第6期北京时间：

作者：薛黎明, 徐佳乐, 冯超, 邱歆磊, 林元杰, 徐骞, 周志俊, 卢大胜, 汪国权,

摘要：背景氟咯草酮（FLC）是一种广泛使用的除草剂。动物毒理研究发现FLC具有潜在肝毒性，但对FLC暴露肝细胞的毒性作用和机制的研究十分有限。目的探索FLC对大鼠肝细胞BRL-3A的毒性作用和潜在毒性机制。方法采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）考察0.1、1、10、100 μmol·L-1 FLC染毒24 h后对BRL-3A肝细胞活性的影响，确定后续试验染毒浓度为1、10、100 μmol·L-1。应用免疫荧光技术检测肝细胞内的活性氧（ROS）水平的变化，用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测锰超氧化物歧化酶（SOD2）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的mRNA表达水平，采用流式细胞术检测肝细胞的死亡率及凋亡率，采用Western blotting法检测环氧合酶-3（Cox3）、凋亡促进因子Bax和B-淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白的表达水平。结果相对于对照组：1、10、100 μmol·L-1浓度FLC染毒肝细胞BRL-3A后，细胞存活率分别为（91.4±4.2）%、（73.5±13.1）%和（66.7±5.5）%（均P < 0.05）；10 μmol·L-1染毒细胞内ROS水平增高至（126.2±12.4）%（P < 0.05）；1~100 μmol·L-1的FLC染毒后SOD2的mRNA表达降低至（29.8±2.1）%、（25.5±2.2）%和（6.6±0.4）%，而GSH-Px的mRNA表达降低至（63.6±4.2）%，（49.9±4.1）%和（26.5±2.1）%（P < 0.001）；10、100 μmol·L-1浓度FLC分别促进细胞凋亡率达（2.2±0.1）、（12.5±0.8）倍，Bax的蛋白表达增高至（1.2±0.1）、（1.4±0.1）倍（P < 0.001），Bcl-2的蛋白表达降低至（41.6±4.0）%和（41.9±3.2）%（P < 0.001），Bcl-2/Bax值降低至（35.2±4.0）%和（30.9±3.1）%（P < 0.001），同时Cox-3的蛋白表达下调至（84.1±8.0）%和（54.2±4.2）%。结论FLC对肝细胞BRL-3A具有明显的毒性效应，随浓度的升高而增强，其毒性机制可能是通过诱发肝细胞氧化损伤，进而促使细胞凋亡。

关键词：氟咯草酮, 肝细胞, 氧化应激, 细胞凋亡, 细胞毒性,