芳香烃受体介导双酚A致斑马鱼胚胎发育毒性

来源：环境与职业医学杂志 2021年第4期北京时间：

作者：王伟, 何梦婷, 许洁, 张洁,

摘要：背景双酚A（BPA）在生命早期暴露会导致发育毒性，芳香烃受体（AhR）能够调控各种发育和生理功能，研究发现BPA可使其激活。目的以斑马鱼作为模式动物，研究AhR在BPA所致斑马鱼胚胎发育毒性中的作用。方法将斑马鱼胚胎随机分为8组进行染毒，分别为DMSO对照组、AhR抑制剂CH223191（CH）对照组、BPA暴露组（1、5、25 μmol·L-1）、CH+BPA（1、5、25 μmol·L-1）组。染毒时间为受精后2 h（2 hpf）至受精后96 h（96 hpf），分别观察斑马鱼胚胎的死亡率、孵化率、畸形率、心率、体长及运动能力。通过荧光定量PCR方法检测AhR相关基因（ahr2、cyp1a1、cyp1b1）、心脏发育关键基因（nkx2.5、sox9b）、神经发育关键基因（elavl3、gfap、mbp、syn2a）、氧化应激相关基因（nrf2、sod1/2、ho1、nqo1）的表达。结果与DMSO对照组相比，25 μmol·L-1 BPA暴露组斑马鱼胚胎出现孵化延迟、心率下降、畸形率升高，5 μmol·L-1和25 μmol·L-1 BPA暴露组出现死亡率增加、体长缩短以及运动距离下降的现象（P < 0.05）。与相应BPA暴露组相比，CH+25 μmol·L-1 BPA组斑马鱼的心率、畸形率、运动能力和CH+5 μmol·L-1 BPA组及CH+25 μmol·L-1 BPA组的体长均有所恢复（P < 0.05）。但孵化率和死亡率并未受CH影响。荧光定量PCR结果表明，BPA组AhR相关基因（ahr2、cyp1a1和cyp1b1）的表达上调（P < 0.05）；CH联合处理后能降低各BPA组ahr2、cyp1a1基因的过表达及25 μmol·L-1 BPA组cyp1b1的过表达（P < 0.05）。心脏发育相关基因（nkx2.5和sox9b）的表达分别在25 μmol·L-1和5、25 μmol·L-1 BPA组出现下调（P < 0.05）；CH联合处理后上述基因的低表达恢复（P < 0.05）。神经发育相关基因elavl3在25 μmol·L-1 BPA组出现下调，gfap和syn2a在5、25 μmol·L-1 BPA组出现下调，mbp在各BPA组均出现下调（P < 0.05）；CH联合处理后上述基因的低表达恢复（P < 0.05）。BPA暴露后氧化应激相关基因的表达也出现改变，其中nrf2在25 μmol·L-1 BPA组出现上调，sod1、ho1和nqo1在5、25 μmol·L-1 BPA组出现上调，sod2在各BPA组均出现上调（P < 0.05）；CH干预后这些基因的表达均恢复到正常水平（P < 0.05）。结论BPA可能通过激活AhR，上调cyp1a1和cyp1b1基因的表达，增强活性氧的产生，从而导致斑马鱼胚胎的发育毒性。

关键词：双酚A, 芳香烃受体, 氧化应激, 斑马鱼, 发育毒性,