双酚A对甲状腺乳头状癌细胞KTC-1增殖的影响

来源：环境与职业医学杂志 2020年第7期北京时间：

作者：汪洁英, 宁博, 陈钰玮, 刘帅, 朱启森, 门可,

摘要：背景 双酚A（BPA）是一种常见的环境内分泌干扰物，其化学结构与雌激素类似，近年来其与肿瘤之间的关系引起普遍关注。甲状腺癌是内分泌系统中发病率最高的恶性肿瘤，BPA对其发生发展的影响值得进一步探索。目的 研究BPA对人甲状腺乳头状癌细胞增殖的影响及相关机制。方法 体外培养人甲状腺乳头状癌细胞KTC-1后传代，随机分为对照组、BPA处理组（BPA浓度分别为5×10-3、5×10-4、5×10-5、5×10-6、5×10-7、5×10-8、5×10-9 mol·L-1），染毒24、48、72 h后，细胞增殖实验（CCK-8）检测细胞增殖活性，倒置显微镜观察细胞形态学改变，流式细胞仪分析细胞周期，免疫印迹法分别检测细胞周期蛋白（Cyclin）D1和细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂（P21）的表达水平。结果 5×10-3 mol·L-1 BPA诱导细胞大量死亡并漂浮于细胞培养液中，残留贴壁细胞出现较多空泡颗粒，细胞间连接消失，且时间越长形态学改变越明显；5×10-7、5×10-9 mol·L-1 BPA处理组细胞呈梭形，同时可观察到明显的细胞分裂现象。与对照组相比，5×10-3、5×10-4、5×10-5 mol·L-1 BPA诱导细胞不同时间（24、48、72 h）的细胞增殖率均有下降（P < 0.05）；5×10-7、5×10-8、5×10-9 mol·L-1 BPA诱导细胞48 h增殖率较对照组明显升高（P < 0.001）；5×10-6 mol·L-1 BPA随着染毒时间的增加细胞增殖率变化不同，在处理24 h后，较对照组下降（P < 0.05），但在处理48、72h后明显升高（P < 0.001）。5×10-5、5×10-6、5×10-7、5×10-8、5×10-9 mol·L-1 BPA处理细胞24 h后流式细胞仪分析结果显示：除5×10-5 mol·L-1 BPA处理组，5×10-6~5×10-9 mol·L-1浓度组的细胞增殖指数（PI）与对照组相比呈现上升趋势，但差异未见统计学意义；但其中5×10-6 mol·L-1 BPA处理组KTC-1细胞进入DNA合成期（S期）的细胞构成比高于对照组（P < 0.05）。与对照组相比，5×10-5 mol·L-1 BPA处理组Cyclin D1蛋白表达水平下降，P21蛋白表达水平上升；5×10-8、5×10-9 mol·L-1浓度处理组Cyclin D1蛋白表达水平上调，P21蛋白表达水平下降，差异均有统计学意义（P < 0.05）。结论 BPA对人甲状腺乳头状癌细胞KTC-1的增殖具有双重效应：高剂量BPA对甲状腺乳头状癌细胞KTC-1有毒作用，导致细胞死亡；低剂量BPA对甲状腺乳头状癌细胞KTC-1有促增殖作用。不同浓度BPA可能通过调节细胞周期蛋白Cyclin D1和P21的蛋白表达水平来促进或者抑制甲状腺乳头状癌细胞KTC-1的增殖。

关键词：双酚A, 人甲状腺乳头状癌细胞KTC-1, 细胞增殖, 细胞周期蛋白Cyclin D1, P21蛋白,