磷酸化胞外信号调节激酶1/2在邻苯二甲酸二丁酯致雄性小鼠肝损伤中的作用

来源：环境与职业医学杂志 2020年第6期北京时间：

作者：万涛, 晏彪, 洪亮,

摘要：背景邻苯二甲酸二丁酯（DBP）具有潜在的肝毒性。胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）的活化形式磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）被证实与肝脏损伤有关。但尚不清楚DBP暴露是否通过p-ERK1/2导致肝损伤。目的探讨氧化应激介导的p-ERK1/2在DBP所致小鼠肝损伤中的作用。方法SPF级雄性KM小鼠28只，随机分为4组：对照组、50 mg·kg-1·d-1 DBP组、2.5 mg·kg-1·d-1 U0126（一种非三磷酸腺苷竞争性的抑制剂，可阻断ERK1/2的磷酸化和激活）组、50 mg·kg-1·d-1 DBP+2.5 mg·kg-1·d-1 U0126组，实验周期28 d。实验结束后测定小鼠肝脏的脏器系数，HE染色观察肝组织病理学变化，采用二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯（DCFH-DA）荧光染料检测各组小鼠肝组织的活性氧（ROS）水平，硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛（MDA）含量，化学比色法检测总抗氧化能力（T-AOC），蛋白质印迹法检测肝组织ERK1/2及其磷酸化（p-ERK1/2）蛋白表达，全自动生化分析仪测定各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）含量。结果染毒28 d后，与对照组相比，DBP组小鼠肝脏的脏器系数（4.97±0.14）%下降，ALT/AST（2.02±0.25）上升，ALB含量（18.54±2.64）U·L-1下降，ROS荧光强度（6 387.0±84.80）增加、MDA含量（1.65±0.10）μmol·g-1（以蛋白计）上升，T-AOC水平（0.55±0.05）U·mg-1下降，p-ERK1/2蛋白表达水平（1.29±0.02）上升（P < 0.05）。经U0126处理后，与DBP组比较，DBP+U0126组小鼠肝脏的脏器系数（5.36±0.33）%上升，ALT/AST（1.40±0.17）下降，ALB含量（28.92±0.69）U·L-1上升，ROS荧光强度（5 934.8±38.07）减弱、MDA含量（1.10±0.08）μmol·g-1（以蛋白计）下降，p-ERK1/2蛋白表达水平（0.90±0.13）下调（P < 0.05）。结论DBP可提高雄性小鼠肝组织的氧化应激水平，上调p-ERK1/2蛋白表达，引起肝功能障碍；而U0126可通过抑制ERK1/2的磷酸化，改善DBP诱导的肝损伤，提示p-ERK1/2参与了DBP诱导的肝损伤。

关键词：邻苯二甲酸二丁酯, 胞外信号调节激酶1/2, 氧化应激, 肝损伤, U0126,