氧化石墨烯片层对小胶质细胞神经免疫效应的调控

来源：环境与职业医学杂志 2020年第5期北京时间：

作者：李清如, 王祎星, 祁宇泽, 权会会, 周辉,

摘要：背景氧化石墨烯（GO）广泛应用于神经生物学领域。近年来研究表明，GO能够参与神经系统的调节过程，但关于其神经免疫效应调控具体机制尚无相关报道。目的探究GO在脂多糖（LPS）和白细胞介素4（IL-4）诱导小胶质细胞M1经典活化表型与M2选择活化表型转化中的神经调控作用。方法在GO基底培养基和对照培养基上对BV2细胞进行培养，分别加入20 μg·L-1 LPS或IL-4诱导BV2细胞表型转化，分组为空白对照组、GO对照组、空白-LPS组、空白-IL-4组、GO-LPS组和GO-IL-4组。比较24 h后培养上清中的细胞数量。利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和流式细胞术分别检测BV2细胞表面M1表型标志物如肿瘤坏死因子α（TNF-α）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、细胞因子CD86以及M2表型标志物如重组人精氨酸酶1（Arg1）、白细胞介素-10（IL-10）、细胞因子CD206表达量的变化，同时使用分光光度法检测培养上清中一氧化氮（NO）的含量。结果与空白对照组相比，GO处理后的BV2细胞细胞计数降低（218.13±8.77和175.63±8.24，P < 0.01）。相比于空白-LPS组，GO-LPS组BV2细胞上M1表型标志物TNF-α、iNOS的mRNA相对表达量（8.16±0.26和5.35±0.42；45.64±2.03和30.39±1.84）以及CD86阳性细胞率（14.65±0.85）%和（10.29±0.46）%降低，并且培养上清中NO的含量（19.62±1.07）μmol·L-1和（8.37±1.25）μmol·L-1降低，M2表型标志物IL-10的mRNA相对表达量升高（1.63±0.09和2.09±0.15）（P < 0.05）。与空白-IL-4组相比，GO-IL-4组M1表型标志物iNOS的mRNA相对表达量增加（0.41±0.03和1.05±0.07），M2表型标志物Arg1以及IL-10的mRNA相对表达量下降（201.63±12.31和4.74±0.38；2.63±0.14和0.71±0.13），CD206的阳性细胞率和平均荧光强度下降（17.01±1.03）%和（3.66±0.41）%；8893.2±347.62和1 299.9±159.67（P < 0.01）。结论GO抑制BV2小胶质细胞生长，并对LPS和IL-4诱导下的神经免疫效应所引起的BV2小胶质细胞向M1和M2表型的转化起到抑制作用。

关键词：氧化石墨烯, 胶质细胞, BV2细胞, 神经免疫, 脂多糖, 白细胞介素4,