绿原酸对反式二氢二醇环氧苯并a芘诱导的细胞凋亡的保护作用和相关分子机制

来源：环境与职业医学杂志 2019年第9期北京时间：

作者：吴静, 吴诗佳, 顾心培, 陈汇丰,

摘要：背景 反式二氢二醇环氧苯并a芘（BPDE）是一种环境致癌物质，可引起细胞凋亡、氧化应激等多种改变。绿原酸（CGA）具有抗氧化作用，但其对BPDE诱导的细胞凋亡的影响尚不明确。 目的 本研究首先采用BPDE染毒，模拟烟草致支气管上皮细胞损伤，然后采用CGA干预，探索其抗凋亡作用及其潜在分子机制。 方法 预实验采用终浓度为0、25、50、100、150、200 μmol/L的CGA分别处理16HBE细胞2、4、8h。根据预实验结果，选择CGA 50μmol/L预处理细胞4h后再进行BPDE 0.5μmol/L染毒12h。实验分为对照组、CGA单独处理组（CGA 50μmol/L）、BPDE单独处理组（BPDE 0.5μmol/L）、CGA干预组（CGA 50 μmol/L+BPDE 0.5 μmol/L）。采用Annexin V/PI染色及流式细胞仪检测细胞凋亡，荧光探针DCFH-DA法检测细胞内活性氧（ROS）水平，Western blot检测凋亡通路相关蛋白caspase-3的剪切体（Cleaved caspase-3）、caspase-9的剪切体（Cleaved caspase-9）、p53、p21的表达水平。 结果 CGA 50、100 μmol/L组各时间点相对细胞活力与对照组相比，差异无统计学意义（P>0.05）；而150、200 μmol/L组处理时长为8 h时，与对照组相比细胞活力下降（P P P P P P P 结论 本研究证实CGA可以抑制BPDE诱导的16HBE细胞凋亡，降低胞内ROS的水平。这种抗凋亡作用可能与caspase-9/caspase-3介导的内源性线粒体途径和抑制BPDE诱导的p53和p21的蛋白表达有关。

关键词：反式二氢二醇环氧苯并[<i>a</i>]芘, 绿原酸, 细胞凋亡, 活性氧, p53, p21,