邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯对INS-1细胞氧化应激和凋亡的影响

来源：环境与职业医学杂志 2019年第4期北京时间：

作者：秦晋, 李奕明, 刘雨薇, 吴岷, 陈波, 厉曙光,

摘要：目的 邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）是一种具有代表性的邻苯二甲酸酯类增塑剂，常被用于塑料制品的生产加工，暴露来源广泛。有流行病学证据表明DEHP暴露与糖尿病的发生发展有一定关联，但鲜见相关基础研究。本研究探究DEHP对大鼠胰岛β细胞（INS-1细胞）氧化应激及细胞凋亡的影响。 方法 体外培养INS-1细胞，并用30、60、120 μmol/L的DEHP处理24 h。用MTT法检测细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率。用2'，7'-二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）检测细胞内活性氧（ROS）含量，可溶性噻唑盐（WST-8）法检测细胞内超氧化物过氧歧化酶（SOD）活性，5，5'-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）比色法检测还原型谷胱甘肽（GSH）及氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量，硫代巴比妥酸（TBA）法检测脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量，用JC-1检测线粒体膜电位。用60、120、240 μmol/L的DEHP作用于INS-1细胞24 h后，用Westernblot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、细胞色素C（Cyt-C）、Caspase-3、Caspase-9的表达。 结果 MTT实验和细胞凋亡检测结果显示，DEHP可导致INS-1细胞的增殖抑制，且120μmol/LDEHP还会引起凋亡（P P P P P P 结论 DEHP可引起INS-1细胞氧化应激，降低线粒体膜电位，激活细胞凋亡线粒体通路相关蛋白的表达，诱导细胞凋亡。

关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯, 胰岛β细胞, 氧化应激, 线粒体膜电位, 细胞凋亡,