JNK/AP-1信号通路在百草枯诱导肺泡上皮细胞间充质转变中的作用

来源：环境与职业医学杂志 2019年第1期北京时间：

作者：朱晨笛, 郭慕真, 李颖颖, 武坷鑫, 黄敏,

摘要：目的 探讨c-jun氨基末端激酶（JNK）/转录因子激活蛋白-1（AP-1）信号通路在百草枯致大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞间发生上皮-间充质转变（EMT）中的作用。 方法 体外培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN，终浓度0、25、50、100、200、300、400μmol/L百草枯处理细胞24 h，终浓度200 μmol/L百草枯分别处理细胞0、12、24、36、48、60、72 h，倒置相差显微镜观察细胞形态学的改变；四甲基偶氮唑盐（MTT）检测细胞相对存活率，确定剂量和时间-效应关系；流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡；细胞划痕实验检测细胞迁移能力；Transwell小室法检测细胞侵袭能力；免疫荧光、免疫印迹法（Westernblot）分别检测上皮标志蛋白E-cad、ZO-1和间质标志蛋白FSP-1、α-SMA表达水平；Westernblot检测JNK/p-JNK、c-jun/p-c-jun、c-fos/p-c-fos蛋白表达水平；双荧光素酶报告基因实验检测AP-1的转录活性，评估百草枯对JNK信号通路的激活作用。 结果 200 μmol/L百草枯诱导细胞由卵圆形或多边形的上皮细胞变成长梭形的间质细胞，细胞间连接消失，且时间越长形态学改变越明显。与对照组相比，100、200、300、400 μmol/L百草枯染毒组的细胞存活率明显降低（PPPPPPP 结论 百草枯呈剂量和时间依赖方式影响上皮细胞活性。百草枯能够诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞发生EMT，JNK/AP-1信号通路可能参与了百草枯诱导肺泡上皮细胞EMT的发生。

关键词：百草枯, Ⅱ型肺泡上皮细胞, 上皮-间充质转变, JNK信号通路, AP-1,