RING2对苯并a芘导致的人支气管上皮细胞BPDE-DNA加合物及CHK1的影响

来源：环境与职业医学杂志 2017年第3期北京时间：

作者：王武斌, 张红杰, 刘艳丽, 杨瑾,

摘要：目的 探讨泛素连接酶RING2对苯并a芘（BaP）导致的人支气管上皮细胞（BEAS-2B）BPDE-DNA加合物及周期检测点激酶1（CHK1）表达水平的影响。 方法 用不同浓度的BaP（0、1、2、4、8、16、32μmol/L）染毒BEAS-2B细胞24 h，以16μmol/L BaP染毒BEAS-2B细胞不同时间（0、1、2、4、8、12、24 h）；通过siRNA干扰技术降低BEAS-2B细胞中泛素连接酶RING2的表达水平，用16 μmol/L BaP染毒BEAS-2B和BEAS-2B（siRNA-RING2）细胞24 h。使用免疫组化荧光法检测细胞中BPDE-DNA加合物的表达情况，采用Western blot检测细胞中CHK1及其S345位点磷酸化的水平。 结果 免疫组化荧光法结果显示，与正常对照组相比，转染前后染毒组的荧光强度均增加（P RING2）染毒组的荧光强度较正常染毒组的增加了32%。Western blot结果显示，随着染毒时间和染毒浓度的增加，BESA-2B的CHK1及CHK1 S345-p的水平逐渐增加（P RING2）细胞24 h后，其CHK1及CHK1 S345-p水平较对照组明显下降（P P RING2）组CHK1及CHK1 S345-p水平的修正均数（分别为0.77和0.89）较BEAS-2B组的修正均数（分别为1.24和1.32）明显降低（P 结论 RING2低表达的细胞DNA对BaP更加敏感，这提示RING2可能通过影响CHK1及其磷酸化水平来调控细胞周期的进程，进而影响DNA的损伤修复。

关键词：苯并[<i>a</i>]芘, 泛素连接酶RING2, BPDE-DNA加合物, 周期检测点激酶1,