《环境与职业医学杂志》发表论文赏析

微小RNA-27b对RAW264.7细胞生物学功能的作用及调控机制

来源:环境与职业医学杂志 2016年第11期北京时间:

作者:隋静, 张艳秋, 李成云, 付艳云, 梁戈玉,

摘要:目的 在分析纳米二氧化钛引起巨噬细胞微小RNA(miR)表达谱改变的基础上,选择与免疫通路相关的miR-27b,探讨miR-27b 对巨噬细胞RAW264.7 的生物学功能及其对靶基因磷脂酰肌醇-3- 激酶调节亚基3(Pik3r3)的调控作用。方法 用Diana-mirPath 在线软件对miR-27b 进行生物学信息分析,并通过Targetscan 软件预测靶基因位点。通过转染使RAW264.7 细胞的miR-27b 表达上调,采用MTT、流式细胞技术观察转染后细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的变化,应用Western blot 检测靶基因的蛋白表达水平。结果 Diana-mirPath 在线软件进行miR-27b 的信号通路及靶基因分析结果显示,miR-27b 参与的信号通路-ln P ≥2.99(P<0.05)的有23 个,其中得分最高的通路为T 细胞受体信号通路(T cell receptor signaling pathway),得分为16.89。靶基因预测结果显示Pik3r3 可能是其靶基因之一。转染miR-27b 模拟物后,转染组与阴性对照组相比较,光密度值无明显差异(P=0.725),细胞周期也无明显差异(G1、S 和G2 期分别为P=0.490,P=0.088,P=0.323),但细胞凋亡率明显增高(P=0.023)。此外,转染组Pik3r3蛋白表达量无明显差异(P >0.05)。结论 miR-27b 可促进RAW264.7 细胞凋亡,其调控机制尚需进一步研究。

关键词:miR-27b, 细胞周期, 细胞凋亡, <i>Pik3r3</i>,

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