镉诱导HK-2细胞信号通路的蛋白磷酸化变化及缝隙连接蛋白43的作用

来源：环境与职业医学杂志 2016年第6期北京时间：

作者：刁海鹏, 于茂辉, 刘庆平, 冀晓丽, 葛泽河, 杜柯贤, 吴庆,

摘要：目的探讨人肾近曲小管上皮细胞在镉（CdCl2）染毒下的信号通路蛋白磷酸化变化及缝隙连接蛋白43（Cx43）的作用。方法选取人肾近曲小管上皮细胞系HK-2，给予1 μmol/L浓度的CdCl2染毒10 d。采用RNA干扰（siRNA）下调Cx43表达，采用Western blot检测Cx43蛋白表达，采用蛋白磷酸化芯片分析细胞信号通路蛋白磷酸化改变。结果在CdCl2染毒HK-2细胞10 d后，蛋白磷酸化发生变化的位点有61个，发生蛋白磷酸化改变的通路有ErbB、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、T细胞受体以及B细胞受体信号通路，细胞增殖下降（P < 0.05），凋亡上升（P < 0.05）；在未染毒时沉默Cx43后，相对于Cx43未沉默组，有56个磷酸化位点发生改变，发生蛋白磷酸化改变的通路有焦点黏连、ErbB、MAPK信号通路等，细胞增殖下降（P < 0.05），而细胞凋亡未发生变化（P>0.05）；而染毒后再短暂下调Cx43，相较于镉染毒组，有102个位点变化，而焦点黏连、ErbB、MAPK、凋亡和趋化因子信号通路相关蛋白磷酸化水平发生变化，细胞增殖未发生变化（P>0.05），而细胞凋亡下降（P < 0.05）。结论镉较长时间染毒HK-2细胞，可能会影响ErbB、MAPK、T细胞及B细胞受体信号通路，抑制细胞增殖，增加细胞凋亡；Cx43表达下降可能会通过改变焦点黏连、ErbB、MAPK、凋亡和趋化因子等信号通路的蛋白磷酸化水平，对细胞增殖与凋亡进行调控。

关键词：氯化镉, 人肾近曲小管上皮细胞, 蛋白磷酸化, 缝隙连接蛋白43, siRNA,