氟咯草酮诱导共培养大鼠睾丸支持-生精细胞凋亡及其可能机制

来源：环境与职业医学杂志 2016年第1期北京时间：

作者：宋晴雯, 徐蕾蕊, 常秀丽, 周志俊,

摘要：目的观察氟咯草酮（FLC）对共培养大鼠睾丸支持-生精细胞的影响，探究可能的机制。方法采用0.1%胶原酶和0.1%透明质酸酶两步酶消化法，分离得到原代睾丸支持细胞和生精细胞，共培养24 h后，分别用0.01、0.10、1.00 μmol/L的FLC染毒24 h。生精细胞脱落试验检测FLC对生精细胞脱落的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡率；实时荧光定量-聚合酶链反应检测凋亡通路关键信号分子和p38 MAPK的mRNA表达。结果FLC染毒可引起支持-生精细胞共培养体系中生精细胞脱落增加，在0.01、0.10和1.00 μmol/L浓度组，生精细胞脱落百分比分别为（238.17±3.78）%，（265.89±9.51）%和（308.73±17.05）%。随着FLC浓度升高，早期凋亡率分别升高至（10.80±1.86）%，（13.52±0.72）%和（16.62±0.35）%；与对照组相比，差异均有统计学意义（P < 0.05或P < 0.001）。在0.10和1.00 μmol/L浓度下，FLC染毒可明显上调凋亡线粒体通路中Bax、Cyt-c、Caspase-9和Caspase-3的mRNA表达（P < 0.05或P < 0.001），同时下调Bcl-2的mRNA表达（P < 0.05）；1.00 μmol/L的FLC可引起FasL与p38 MAPK的mRNA表达升高（P < 0.05）。结论FLC染毒可影响大鼠睾丸支持-生精细胞共培养体系中凋亡通路相关信号分子的mRNA表达，p38 MAPK信号通路可能参与了FLC诱导的细胞凋亡。

关键词：氟咯草酮, 雄性生殖毒性, 支持-生精细胞共培养, 凋亡, 信号通路,