二氧化硅刺激A549细胞水通道蛋白-1表达:体外研究

来源：环境与职业医学杂志 2015年第8期北京时间：

作者：郝小惠, 郭志义, 张芳, 刘嘉祺, 孙悦, 刘和亮,

摘要：目的 研究二氧化硅(SiO2)粉尘刺激对人肺泡上皮A549细胞水通道蛋白-1(AQP-1)的表达及意义。 方法 将A549细胞分为对照组、染毒组及抑制剂组。其中染毒组细胞利用50 mg/L的SiO2混悬液刺激细胞,SiO2分别刺激0.5、1、2、4、8 h后检测mRNA表达; SiO2分别刺激3、6、12、24 h后检测蛋白表达。抑制剂组则先加入AQP-1特异性的通道抑制剂氯化汞(HgCl2)孵育3 min后再加SiO2刺激2 h检测mRNA,刺激6 h检测蛋白表达。各组采用实时聚合酶链反应法检测AQP-1 mRNA表达水平,Western blot、免疫细胞化学检测AQP-1蛋白表达水平。 结果 AQP-1mRNA表达:与对照组相比,SiO2刺激后的0.5、1、2、4 h A549细胞AQP-1 mRNA的表达量分别是对照组的2.78、3.52、3.85、1.98倍,8 h时回到对照组水平(P2染毒组的65%。AQP-1蛋白表达:①免疫印迹检测结果显示,与对照组相比,SiO2刺激后的3、6、12、24 h A549细胞的表达量分别为对照组的1.44、2.56、1.93、1.35倍(PP2染毒组,为其70%(P2刺激后的3、6、12、24 h A549细胞的表达量分别为对照组的1.17、1.49、1.29、1.07倍(PP2染毒组,为其71%(P 结论 SiO2刺激使A549细胞的AQP-1表达增高,其特异性抑制剂氯化汞可抑制SiO2刺激引起的AQP-1的表达增高,推测AQP-1可能参与了矽肺的发生发展过程。

关键词：水通道蛋白-1, 二氧化硅, A549细胞, 肺上皮细胞, 矽肺,