孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白ComOBP1基因的克隆和时空表达

来源：环境昆虫学报杂志2016年第2期北京时间：

作者：潘畅，张宇宏，谢佳沁，李浩森，庞虹*

单位：(1有害生物控制与资源利用国家重点实验室 生物多样性演化与保护广东普通高校重点实验室,2 广东省昆虫研究所 广东省农业害虫综合治理重点实验室,3 根特大学生物工程学院植物保护系

摘要：采用RT-PCR和RACE技术，从孟氏隐唇瓢虫 Cryptolaemus montrouzieri Mulsant中成功克隆出气味结合蛋白（ComOBP1）基因的全序列（Genbank 登陆号：KU170686）。ComOBP1基因全长922 bp，包括5′端长为40 bp的非编码区域（UTR），及3′端长为462 bp的UTR，开放阅读框ORF长为420 bp，编码139个氨基酸，预测的分子量为15.516 kDa，等电点pI为6.57，存在AATAAA加尾信号。N-末端疏水区包含由20个氨基酸构成的信号肽，无跨膜结构，有4个保守的半胱氨酸，属于Minus-C OBP，也是在孟氏隐唇瓢虫中发现的第一个Minus-C OBP。氨基酸序列中有且仅有一个N-糖基化位点为62 NLSA，并存在2个潜在的磷酸化位点。与其它昆虫的Minus-C OBPs进行同源性比较并构建系统发育树，发现与同为鞘翅目Coleoptera昆虫的同源性较高。利用Real-time PCR、RT-PCR技术对CmonOBP1基因在孟氏隐唇瓢虫不同发育阶段，不同组织，不同营养条件及不同食性下的表达水平进行了测定，结果显示，CmonOBP1基因在整个发育阶段均有表达，雄性成虫期具有最高表达量，且多在成虫的头部及翅部表达。当营养条件发生变化时，表达丰度不会发生变化，当猎物由天然猎物柑橘粉蚧 Planococcus citri Risso变成碗豆修尾蚜 Megoura japonica Matsumura时，表达量会明显下降。该结果表明，孟氏隐唇瓢虫的不同发育阶段、不同组织及猎物种类会影响CmonOBP1基因的表达，从而进一步影响其嗅觉行为。同时，CmonOBP1基因可能在雄虫相关的信息素感受过程中发挥着重要作用。

关键词：孟氏隐唇瓢虫,气味结合蛋白,CmonOBP1基因,基因克隆,序列分析,时空表达,

基金资助：国家重点基础研究发展计划（973计划）项目（2013CB127600）；国家自然科学基金面上项目（31171899，31572052）；国家自然科学基金项目（31301720）