家蝇溶菌酶MDLZM2基因的克隆、序列分析及原核表达

来源：环境昆虫学报杂志2016年第1期北京时间：

作者：魏川川，彭传林，胡 亚，修江帆，王 宇，尚小丽，吴建伟*

单位：(1．贵州医科大学基础医学院,2.贵州省疾病预防控制中心

摘要：对家蝇溶菌酶( Musca domestica lysozyme , MDLZM2 )基因进行克隆、序列分析，构建原核表达载体并在大肠杆菌中表达。 从GenBank家蝇基因组中筛选获得 MDLZM2 基因。以该基因的序列设计引物，进行PCR扩增，测序分析获得该基因完整编码序列。运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽、二级结构、三级结构和保守结构域等方面进行预测和分析。构建 pEASY-E1-MDLZM2 重组质粒，转化到大肠杆菌BL21(DE3)pLysS Chemically Competent Cell 中进行诱导表达及纯化。结果表明 MDLZM2 基因ORF全长552 bp，编码183个氨基酸，理论分子量21.2 kDa；等电点为6.13，具有 Lysozyme 家族的蛋白保守结构域。成功构建重组原核表达 pEASY-E1-MDLZM2并诱导表达、纯化重组蛋白，为进一步研究该蛋白的生物学及免疫学活性奠定了基础。

关键词：家蝇,Lysozyme,克隆,原核表达,生物信息学,

基金资助：国家科技支撑计划（2011BAC06B12）；国家自然科学基金（81360254）；黔科合NY【2014】3054号；黔科合LH字\[2014\]7076；贵州省卫生计生委科学技术基金项目（gzwjkj2014-2-100）；贵州省高等学校创新能力提升计划（2011计划）(07060151306)