褐飞虱ABCB基因的克隆与表达分析

来源：环境昆虫学报杂志2020年第2期北京时间：

作者：闸雯俊，李三和，周雷，陈志军，刘凯，杨国才，徐华山，李培德，游艾青

单位：1. 湖北省农业科学院粮食作物研究所 粮食作物种质创新与遗传改良湖北省重点实验室,2. 长江大学 主要粮食作物产业化湖北省协同创新中心

摘要：三磷酸腺苷结合盒转运蛋白（ATP binding cassette，ABC）广泛分布于各种生物体中，是最大的膜蛋白家族之一。在昆虫中，ABC转运子不仅在分子转运过程中有重要的功能，同时在杀虫剂抗性、代谢和发育中都起到重要的作用。本研究克隆和鉴定了褐飞虱 Nilaparvata lugens St?l ABCB基因(NlABCB），结果表明NlABCB 基因全长1 468 bp，含有一个长度为459 bp的开放阅读框，编码153个氨基酸。利用定量PCR检测NlABCB基因在褐飞虱体内的表达，发现NlABCB 转录本在褐飞虱的所有发育阶段都有表达，在1龄若虫中表达量最低，随着生长发育表达量逐渐升高。 NlABCB 在褐飞虱5龄若虫的中肠中表达量最高。研究发现该基因与褐飞虱的生理活动有关。构建 NlABCB-dsRNA载体，转化大肠杆菌Escherichia coli HT115后，经IPTG诱导，形成NlABCB-dsRNA,喂养褐飞虱取食含NlABCB-dsRNA人工饲料，发现褐飞虱的存活率明显降低。因此该基因的克隆和功能鉴定，对于作物的抗虫育种，尤其对水稻害虫的生物防治将起到重要的促进作用。

关键词：褐飞虱,NlABCB,克隆,dsRNA,

基金资助：国家转基因重大专项(2018ZX0800101B)；国家重点研发计划（2018YFD0100806）；国家基金项目(31501654)；杂交水稻国家重点实验室基金(KF201801)