小菜蛾PGRP-S2基因的克隆表达及功能分析

来源：环境昆虫学报杂志2020年第2期北京时间：

作者：杜少萱，吴程，苏月华，杨梅

单位：福建师范大学生命科学学院

摘要：肽聚糖识别蛋白（peptidoglycan recognition protein, PGRP）对于昆虫来说是一种高度保守的病原识别蛋白。为阐明PGRP-S2在小菜蛾Plutella xylostella抵抗病原微生物过程中的作用，本研究结合RT PCR和RACE技术克隆得到小菜蛾PGRP-S2基因的cDNA全长序列，命名为PGRP-S2（GenBank登录号：MG570190）。生物信息学分析结果表明，PGRP-S2的开放阅读框为588 bp，编码195个氨基酸；蛋白质预测分子量为21 46 kDa，理论等电点为8 46；编码蛋白具有PGRP超家族保守结构域和酰胺酶结构域，是典型的肽聚糖识别蛋白，包含一条信号肽，不存在跨膜结构；同源序列比对和系统进化树分析表明 PGRP-S2与家蚕Bombyx mori的BmPGRP S1进化距离最近。利用大肠杆菌 Escherichia coli BL21（DE3）高效表达重组蛋白PxPGRP-S2，利用倒置显微镜及平板涂布观察重组蛋白对大肠杆菌E. coli和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus的作用，结果表明PxPGRP-S2蛋白能够与两种细菌发生结合并凝集细菌，但不具备直接杀菌功能。本研究为进一步研究基于PGRP-S2介导的小菜蛾免疫防御反应提供基础。

关键词：小菜蛾,肽聚糖识别蛋白,原核表达,凝集试验,

基金资助：福建省自然科学基金（2018J01726）