基于通用引物的多重PCR对小圆胸小蠹的分子鉴定

来源：环境昆虫学报杂志2022年第4期北京时间：

作者：黄卫东，梁建锋，彭锋，桑文，陈晓胜，王兴民

单位：1. 广东省生物农药创制与应用重点实验室 生物防治教育部工程技术研究中心,2. 华南农业大学林学与风景园林学院

摘要：本研究利用通用引物的多重PCR方法开展小圆胸小蠹Euwallacea fornicatus的分子鉴定，以期探究多重PCR在昆虫分子鉴定中的可行性，并为开展小圆胸小蠹的有效、准确鉴定及综合防治等提供重要依据。使用多重PCR方法扩增了小圆胸小蠹的COI、16S和28S的3个分子片段，并将获得的目的序列在GenBank中进行BLAST比对；利用MEGA 7计算方胸小蠹属不同种间的遗传距离，并基于邻接法和最大似然法分别构建单基因系统发育树。结果表明：多重PCR可以用于小圆胸小蠹分子序列的获取；基于COI和16S的遗传距离分析表明了小圆胸小蠹的种内遗传距离均小于2%；基于单个基因构建的系统发育树均显示本研究扩增的小圆胸小蠹COI和16S序列与GenBank中获取的小圆胸小蠹COI和16S序列聚为一支。多重PCR可以应用于小圆胸小蠹的分子鉴定，该方法不仅可以提高物种鉴定的准确率，还可以减少PCR过程中的时间和DNA消耗。

关键词：多重PCR,小圆胸小蠹,分子鉴定,COI,16S rDNA,28S rDNA,

基金资助：广州市科技计划重点项目（201804020070）；广东省潮州市农业农村局项目（PZH019D021）