中华蜜蜂OBP19的克隆与时空表达分析

来源：环境昆虫学报杂志2022年第2期北京时间：

作者：马秀梅，杜亚丽，刘晋佳，姚慧敏，张宇昊，马卫华，姜玉锁

单位：1.山西农业大学动物科学学院,2.山西省农业科学院园艺研究所

摘要：本研究克隆获得了中华蜜蜂Apis cerana cerana（简称中蜂）的气味结合蛋白（odor-binding proteins，OBPs）基因AcerOBP19的cDNA序列，预测其蛋白结构，明确该基因在不同发育时期各组织的表达水平。PCR扩增AcerOBP19基因的开放阅读框序列，应用生物信息学软件对其编码蛋白的理化特性、结构特征和系统进化进行分析；用qRT-PCR技术对AcerOBP19在中蜂不同发育时期（1、5、10、15、20、25日龄）各组织（触角、足、口器、毒腺和中肠）中mRNA的表达情况进行分析。获得了AcerOBP19的完整ORF序列，序列长为420 bp，共编码139个氨基酸；含有4个保守的半胱氨酸位点，属于Mins-C OBP亚家族；N-末端有一段含16个氨基酸的信号肽，无跨膜结构。该蛋白包含6个α螺旋和2个二硫键。系统进化树分析表明，AcerOBP19与大蜜蜂Apis dorsata OBPs、小蜜蜂Apis florea OBPs和西方蜜蜂Apis melifera OBPs的氨基酸序列一致性较高，表明它们之间在进化关系上更加同源，且AcerOBP19具有PBP-GOBP superfamily家族的保守结构域，是一种分泌蛋白。qRT-PCR结果表明AcerOBP19在中蜂不同发育时期的各组织中均有表达，其中，15日龄触角中的表达量极显著高于其它组织（P<0.01），在其它日龄中足的表达量极显著高于其它组织（P<0.01）；在各个时期中口器和毒腺中有较高表达，中肠中呈微量表达。通过AcerOBP19组织表达谱结果，推测AcerOBP19不仅参与嗅觉识别机制，在味觉识别过程中也可能发挥作用。

关键词：中华蜜蜂,AcerOBP19,基因克隆,生物信息学,时空表达,

基金资助：现代农业产业技术体系（蜜蜂）建设专项资金（CARS-44-KXJ23）