管氏肿腿蜂毒液过敏原3基因的克隆及表达分析

来源：环境昆虫学报杂志2023年第4期北京时间：

作者：汪斌伟，樊晓红，吴朝妍，朱家颖

单位：西南林业大学生物多样性保护学院 云南省森林灾害预警与重点实验室

摘要：为研究管氏肿腿蜂Scleroderma guani毒液过敏原3基因SgA3的功能，通过RT-PCR克隆SgA3基因，采用荧光定量PCR分析其在不同发育阶段和组织中的表达特征，并利用载体pSUMO-Mut对其进行原核表达。克隆获得SgA3基因开放阅读框长699 bp，编码233个氨基酸，其中信号肽位于N端第1~23位氨基酸。多序列比对分析发现，SgA3与丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitripennis、粉蝶盘绒茧蜂Cotesia glomerata、红火蚁Solenopsis invicta和常见黄胡蜂Vespula vulgaris过敏原3的氨基酸序列一致性分别为50.44%、50%、48.89%和47.83%。荧光定量PCR结果表明，SgA3基因在雌成虫中高表达，且在毒液器官中的表达量显著高于雌成虫其他组织和雄成虫中的表达量。利用pSUMO-Mut表达载体，成功表达并纯化得到高纯度的SgA3重组蛋白。该研究结果为进一步研究SgA3基因的功能奠定了基础。

关键词：毒液,过敏原3,基因克隆,表达特征,原核表达,

基金资助：国家自然科学基金（32060126）；国家林草科技创新计划青年拔尖人才项目（2019132615）；中国科学院“西部之光”人才培养计划“西部青年学者”项目；云南省高层次人才培养项目（YNWR-QNBJ-2018-393）