《环境昆虫学报杂志》发表论文赏析
作者:宋宇轩,董舒楠,叶道有,臧 贺,范小雪,邱剑丰,陈大福,严提珍,郭 睿
单位:1. 福建农林大学蜂学与生物医药学院,2. 天然生物毒素国家地方联合工程实验室,3. 福建省蜂疗研究所,4. 东莞市妇幼保健院生殖与遗传研究所
摘要:本文解析了东方蜜蜂Apis cerana突触囊泡糖蛋白2B(Synaptic vesicle glycoprotein 2B,AcSV2B)的理化性质和分子特征,检测AcSV2B基因在东方蜜蜂工蜂不同组织和发育阶段的表达模式,丰富AcSV2B信息并为进一步的功能研究提供基础。通过Stem-loop RT-PCR和Sanger测序验证AcSV2B在东方蜜蜂工蜂的表达和序列真实性。通过相关生物信息学软件预测AcSV2B的理化性质、信号肽、磷酸化位点、二级结构及三级结构,鉴定和比较东方蜜蜂和其他物种SV2B的结构域及保守基序,并进行系统进化树的构建和分析。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测AcSV2B在工蜂的触角、中肠、脑、毒腺、表皮、咽下腺和脂肪体等不同组织,卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫,以及不同日龄工蜂成虫中的相对表达量。AcSV2B在东方蜜蜂工蜂体内真实存在,符合预测结果。AcSV2B含3 814个核苷酸,编码671个氨基酸;AcSV2B的分子量约为72.87 ku,分子式为C3317H5162N842O940S31,脂溶系数为102.32,等电点为6.02,包含24个丝氨酸磷酸化位点和11个跨膜结构域,不含典型的信号肽,主要分布于内质网。AcSV2B含1个结构域和3个保守基序。东方蜜蜂、小蜜蜂Apis florea和西方蜜蜂Apis mellifera的SV2B在进化树上聚为一支。AcSV2B的表达量在脑中最高且显著高于触角、中肠、毒腺、表皮、咽下腺和脂肪体中的表达量(P<0.05);AcSV2B在8日龄预蛹中的表达量最高且显著高于卵、3日龄幼虫和7日龄预蛹中的表达量(P<0.05);AcSV2B在18日龄成虫中的表达量最高且显著高于1日龄、2日龄、6日龄和12日龄成虫中的表达量(P<0.05)。AcSV2B可能是一种亲水性蛋白、跨膜蛋白和胞内蛋白,东方蜜蜂、小蜜蜂和西方蜜蜂的SV2B保守性和同源性较高,AcSV2B在脑、8日龄预蛹和18日龄成虫中特异性高表达。
关键词:东方蜜蜂,突触囊泡糖蛋白,分子特征,系统进化,表达模式,
基金资助:国家自然科学基金面上项目(32372943,32172792);国家现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-44-KXJ7);福建农林大学硕士生导师团队项目(郭睿);福建省自然科学基金面上项目(2022J01133,2023J01447);福建农林大学科技创新专项基金(KFb22060XA)