实时荧光定量PCR法快速测定水中微囊藻

来源：环境监测管理与技术杂志2013年第6期北京时间：

作者：李继影；吴昕贤；徐恒省；刘孟宇；景明；

单位：苏州市环境监测中心站时荧光定量PCR法快速测定水中微囊藻；苏州太湖国家旅游度假区农业发展局；苏州市环境监测中心站；苏州市环境监测中心站；苏州市环境监测中心站；

摘要：以铜绿微囊藻（Microcystis aeruginosa）16S rRNA基因片段为靶序列设计一对特异性引物，采用Real time PCR法，对铜绿微囊藻进行定性、定量检测。试验表明，仅含铜绿微囊藻DNA模板的样品有特异性扩增，扩增产物熔解曲线平稳，峰尖且窄，熔解温度为（87±1）℃。以重组质粒pMD-18T-16S为标准品，检测区间为1.1×102 copies/mL～1.1×108 copies/mL，所得标准曲线符合制备实时定量PCR标准曲线的要求，对标准品进行测定，方法检出限为11 copies/mL。用该标准曲线对实验室培养获得的铜绿微囊藻DNA样品进行定量检测，与显微镜计数结果基本一致。

关键词：微囊藻,实时荧光定量PCR法,16S rRNA,水质,

基金资助：国家水体污染控制与治理科技重大专项基金资助项目（2012ZX07506-003）