小鼠CD40胞外段的原核表达及多克隆抗体的制备

来源：湖北农业科学杂志2020年第6期北京时间：

作者：曹旗, 潘悦, 郑宇, 王菡, 任洪林, 胡盼, 李岩松, 周玉, 柳增善, 卢士英

单位：吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室,长春 130062

摘要：为了探讨CD40抗体与CD40结合对B细胞应答小分子半抗原的增强作用,利用TRIzol法提取BALB/c小鼠脾脏总RNA,并反转录成cDNA;根据CD40的胞外段CDS设计引物,通过PCR扩增目的基因,构建pGEX4T-1-CD40表达载体,进行原核表达及多克隆抗体制备。结果表明,成功扩增了522 bp的目的基因,表达并纯化获得了45 ku的CD40重组蛋白,多克隆抗体抗体不但可与重组蛋白结合,与小鼠脾脏天然CD40蛋白也可以特异性结合。说明CD40重组蛋白表达成功,且制备的抗体有望模拟CD40L为B细胞活化提供第二信号。

关键词：CD40,原核表达,多克隆抗体,半抗原,免疫增强

基金资助：吉林大学省校共建项目（SXGJSF2017-6）