熊果苷合成酶固定化条件研究

来源：湖北农业科学杂志2021年第2期北京时间：

作者：李皓, 盛希群, 刘静, 钟星

单位：湖北大学知行学院生物与化学工程学院,武汉 430011

摘要：将转化至Escherichia coli BL21 Gold（DE3）中aglA基因的质粒表达葡萄糖苷酶用以催化生产α-熊果苷。再利用超声波破碎技术和镍离子层析柱提取并纯化转葡萄糖苷酶,并将其用海藻酸钠-明胶混合固定,使其可重复使用。确定最佳的固定化条件,即将3.0%海藻酸钠和3.0%明胶配制溶解于pH 7的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液的混合胶体,在高度45 cm左右进行滴定4 ℃预冷的300 g/L氯化钙溶液并固定化20 min。冲洗后进行50 min的-20 ℃钙化操作,获得直径为3.97 mm、质量为0.311 g的固定化珠。

关键词：诱导表达,α-熊果苷,转葡萄糖苷酶,固定化