猪CD150真核表达载体的构建及其在Marc-145细胞中的稳定表达

来源：湖北农业科学杂志2021年第5期北京时间：

作者：张兰1, 梁婉2, 周丹娜2, 杨克礼2, 郭锐2, 李鹏1, 田永祥2

单位：1.长江大学动物科学学院,湖北 荆州 434025; 2.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,武汉 430064

摘要：试验克隆获得了猪全长CD150基因序列,将其连接到真核表达载体pEGFP-N1上获得重组载体pEGFP-N1-CD150。通过测序、Western-blot、瞬时转染,确认了pEGFP-N1-CD150的表达效果。结果表明,pEGFP-N1-CD150载体测序结果与CD150基因序列比对率100%;Marc-145细胞密度在70%~80%时质粒转染效果最佳,24 h为转染高峰期,绿色荧光最强;Western-blot鉴定到分子质量约为80 kDa的蛋白,与预期大小符合,表明CD150蛋白成功表达。

关键词：猪,淋巴细胞刺激因子（CD150）,真核表达

基金资助：中国博士后基金面上项目（2019M652609）