高山松miR482a的鉴定及其表达分析

来源：湖北农业科学杂志2021年第17期北京时间：

作者：王稳利, 曾倩倩, 刘岩, 邱宗波

单位：河南师范大学生命科学学院/河南省农业微生物生态与技术国际联合实验室,河南 新乡 453007

摘要：以裸子植物高山松（Pinus densata）为试验材料,利用实验室前期构建的高山松miRNA数据库,通过生物信息学方法筛选了与生长发育相关的miR482a,并通过RLM-5′RACE 的方法验证了NBS-LRR抗性蛋白（Unigenes45569）是高山松 miR482a的靶基因。通过PCR方法克隆得到高山松miR482a前体序列是130 bp,并可形成稳定的茎环发夹结构,但其成熟序列的碱基保守性较差。系统进化显示pde-miR482a与裸子植物欧洲云杉的进化关系较近。经qRT-PCR分析表明,pde-miR482a在根中表达量最高,其次是在茎中。而靶基因Unigenes45569 在根和茎中的表达水平相对较低,暗示pde-miR482a 可以通过调控靶基因NBS-LRR抗性蛋白（Unigenes45569）而参与高山松的生长发育。

关键词：高山松（Pinusdensata）,miR482a,靶基因,荧光定量PCR

基金资助：国家自然科学基金项目（31500499）; 河南省高校科技创新人才项目（16HASTIT019）