小鼠IL-1β原核表达及其与在布鲁氏杆菌侵染巨噬细胞中差异表达的初步研究

来源：湖北农业科学杂志2022年第6期北京时间：

作者：杨馨, 邹德颖, 张凯, 常江, 常恒祯, 战俊澎, 郭珣, 刘益辛, 程梦妍, 韩成, 胡盼, 卢士英, 李岩松, 柳增善, 任洪林

单位：吉林大学人兽共患病研究教育部重点实验室/人兽共患病研究所/动物医学学院,长春 130062

摘要：为研究IL-1β在布鲁氏杆菌（Brucella）侵染小鼠巨噬细胞过程中的表达情况,首先构建重组小鼠IL-1β原核稳定表达系统,免疫新西兰兔获得多克隆抗体,通过ELISA检测血清效价,并通过Western blot分析其活性,再以感染复数（multiplicity of infection,MOI）为1∶100（细菌∶细胞）建立猪种布鲁氏杆菌S2株侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7的模型,利用RT-PCR检测细菌侵染过程中IL-1β和MyD88 mRNA的变化水平;Western blot分析IL-1β在蛋白水平的变化。结果表明,重组蛋白IL-1β分子质量31 ku,多克隆抗体效价为1∶256 000,并且具有良好的特异性;与对照组相比,感染后IL-1β mRNA和IL-1β蛋白表达上调,胞内细菌数减少。猪种布鲁氏杆菌S2株侵染巨噬细胞IL-1β的表达量随时间变化并影响胞内活菌数。

关键词：布鲁氏杆菌（Brucella）,原核表达,多克隆抗体,IL-1β,MyD88

基金资助：吉林省科技发展计划资助项目（20200402059NC）; 中央高校基本科研业务费专项资金资助项目（45121031B007）