重组早孕因子的原核表达及多克隆抗体制备

来源：湖北农业科学杂志2023年第5期北京时间：

作者：王聪1, 王菡1, 张海玲2, 肖毅然1, 郭禹汐1, 刘梦迪1, 李浩菘1, 吴宗澄1, 段芙春1, 卢士英1

单位：1.吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究教育部重点实验室,长春 130112; 2.中国农业科学院特产研究所,长春 130112

摘要：对牛源早孕因子进行生物信息学分析,构建了含有促溶标签的原核表达载体pET-28a-srEPF,经IPTG成功诱导表达,亲和层析纯化早孕因子,再以重组蛋白为免疫原,免疫动物制备多克隆抗体, Western blotting对表达蛋白及其多抗进行检测。结果表明,成功制备早孕因子重组蛋白,分子质量为 26 ku,纯化后BCA法测定其浓度为1.1 mg/mL,早孕因子重组蛋白和去除抑制区的EPF蛋白均可与制备的多抗特异性结合,间接ELISA测定其效价为1:256 000。

关键词：早孕因子,原核表达,多克隆抗体

基金资助：国家自然科学基金面上项目（32072943）