胱硫醚-β-合成酶的高效表达及酶学性质研究

来源：湖北农业科学杂志2024年第11期北京时间：

作者：陈武1, 刘春华2, 何鹏辉2, 蔡冬波2,3, 陈守文2, 王冬4

单位：1.广东肇庆星湖生物科技股份有限公司,广东 肇庆 526040;2.湖北大学生命科学学院,武汉 430062;3.珠海茵智生物技术有限公司,广东 珠海 519085;4.重庆市农业科学院,重庆 400050

摘要：以酿酒酵母的cbs基因序列为模板,依据大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）的密码子偏好性进行密码子优化,以pET28a（+）为骨架构建表达质粒pET28a-cbs,并利用Escherichia coli BL21（DE3）进行胱硫醚-β-合成酶（CBS）的表达,同时优化诱导表达条件并分析CBS的酶学性质。结果表明,在诱导温度为16 ℃、IPTG浓度为0.1 mmol/L、诱导时间为18 h时,CBS浓度最高,为266.67 mg/L。CBS发挥催化作用过程中也受到多种环境因素的影响,在40~55 ℃时,CBS相对酶活性迅速下降,CBS不适宜长期保存于温度大于40 ℃的环境中;CBS适宜长期保存于pH为6.5~8.5的缓冲溶液中,不宜保存在过酸或过碱的缓冲溶液中;CBS在温度40 ℃、pH 8.0条件下,酶活性较高。

关键词：胱硫醚-β-合成酶（CBS）,高效表达,酶学性质,诱导表达