多重连接探针扩增技术检测食源性致病菌

来源：湖北农业科学杂志2024年第11期北京时间：

作者：何名扬, 王鸣秋, 刘艳, 李诗瑶, 付文雯, 郭雅晴, 周陶鸿, 张莉, 彭青枝

单位：湖北省食品质量安全监督检验研究院/国家市场监管重点实验室（动物源性食品中重点化学危害物检测技术）/湖北省食品质量安全检测工程技术研究中心,武汉 430075

摘要：基于多重连接探针扩增技术（MLPA）,建立了一种能够同时检测食品中11种常见食源性致病菌的方法。通过设计并合成特异性MLPA探针,与高温变性后的标准菌株DNA进行杂交、连接、PCR扩增反应,利用毛细管电泳法分析PCR扩增产物。结果表明,利用11对探针分别对单一致病菌核酸样品进行检测,每种待测物均为单一峰,未出现杂峰,说明11对探针之间不存在交叉影响,探针特异性良好;利用11对探针同时对混合致病菌核酸样品进行多重检测,每种待测物均可得到与预期大小一致的扩增峰,扩增峰之间互不干扰,空白对照中没有扩增出任何目的扩增峰,说明该体系能同时检测多种食源性致病菌。该技术检测结果特异性强,可检出的最低致病菌污染量为1.5×105 CFU/mL,作为对传统微生物检测技术的补充,MLPA技术可应用于食源性致病菌的早期筛查以及食品微生物安全风险的监控。

关键词：食源性致病菌,多重连接探针扩增技术,食品检测

基金资助：湖北省重点研发计划项目（2020BCA091）; 湖北省食品质量安全监督检验研究院联合创新项目（HBQT-LH202102）