滑液囊支原体二氢硫辛酰胺脱氢酶的诱导表达及生物学特性

来源：湖北农业科学杂志2024年第12期北京时间：

作者：曹晓怡1,2, 胡巧2, 张文婷2, 邓兰兰1,2, 郭云清2, 卢琴2, 张蓉蓉2, 张鹤平1, 罗青平2,3

单位：1.河北工程大学生命科学与食品工程学院,河北 邯郸 056038; 2.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,武汉 430064; 3.湖北洪山实验室,武汉 430070

摘要：为了获得滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae,MS）二氢硫辛酰胺脱氢酶（PdhD）的蛋白表达产物,分析蛋白的免疫原性,采用DNAStar Protean软件分析PdhD的二级结构和主要抗原域。将PdhD基因的第593、731、1 712、1 833 nt处的A突变为G,使改造成功的基因能够在大肠杆菌BL21中正确表达;经IPTG诱导后获得约70 ku的蛋白。对PdhD蛋白的622个氨基酸进行二级结构的预测,Garnier-Robson法预测出18个α螺旋中心、12个β折叠区段和17个T转角区段,Chou-Fasman法预测出24个α螺旋中心、23个β折叠区段和37个T转角区段,Karplus-Schulz法预测出42个柔性区域。PdhD的主要抗原域为Gln27-Phe36、Vla38-Val51、Ala89-Ala99、Pro137-Asp159、Gly307-Ile336、Gly369-Gly386、Gly397-Gln416、Ala433-Val447、Ieu486-Tyr504、Ala541-Asn549。免疫原性分析发现,PdhD重组蛋白能与兔源Anti-MS血清发生强烈反应,与兔源Anti-MG血清和兔源血清Blank均不发生反应。PdhD具有免疫原性,可作为候选抗原用于亚单位疫苗的研发。

关键词：滑液囊支原体（Mycoplasmasynoviae,MS）,二氢硫辛酰胺脱氢酶,诱导表达,免疫原性分析,生物学特性

基金资助：河北省重点研发计划项目乡村振兴技术创新专项（22327311D）; 湖北省农业科学院青年科学基金项目（2024NKYJJ19）; 国家肉鸡产业技术体系项目（CARS-41）; 湖北省重点研发计划项目（2022BBA0055）; 湖北省科技重大专项（2020ABA016）; 湖北省自然科学基金重点类项目（2021CFA019）