《湖北农业科学杂志》发表论文赏析

农杆菌介导的稻瘟病菌遗传转化体系的建立及优化

来源:湖北农业科学杂志2025年第3期北京时间:

作者:李爽1, 张淑梅1, 田缘1,2, 潘钰1,3, 刘伟1, 闫更轩1

单位:1.黑龙江省科学院微生物研究所,哈尔滨 150010;2.东北农业大学食品学院,哈尔滨 150030;3.黑龙江大学生命科学学院,哈尔滨 150006

摘要:以稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)为试验材料,通过PCR获得GFP基因,构建pBarg-GFP-BAR-Amp重组载体,使用农杆菌转化法获得能够稳定遗传的含GFP基因的稻瘟病菌菌株,采用单因素与响应面法优化转化条件。稻瘟病菌遗传转化体系的最佳转化条件:OD600 nm为 0.38(农杆菌菌液浓度)、共培养温度为28.2 ℃、共培养时间为2.12 d,转化效率为280.00×10-5。PCR鉴定和荧光显微镜观察发现,转化的稻瘟病菌GFP基因能够正常表达,和野生型稻瘟病菌的致病性无显著差异。

关键词:稻瘟病菌(Magnaportheoryzae),农杆菌介导,遗传转化,GFP基因,建立,优化

基金资助:省属科研院所科研业务费项目(CZKYF2021-2-C031)

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