食品中金黄色葡萄球菌的等温多自配引发扩增（IMSA）方法优化与应用

来源：湖北农业科学杂志2025年第9期北京时间：

作者：郭振1, 曾春梅1, 谢玉锋2,3, 李莎1, 吴观凤1, 张庆发4, 宋淑婷4

单位：1.江西煌上煌集团食品股份有限公司技术中心,南昌 330200; 2.哈尔滨学院食品工程学院,哈尔滨 150086; 3.酿酒生物技术及应用四川省重点实验室,四川 宜宾 643002; 4.广州迪澳生物科技有限公司,广州 510700

摘要：基于nuc基因设计特异性引物,通过设置不同温度、孵育时间、酶用量等条件进行梯度试验,优化等温多自配引发扩增(Isothermal multiple self-matching-initiated amplification,IMSA)方法的反应体系,并对其特异性、灵敏度进行评估,同时与PCR方法对比。结果表明,IMSA方法的反应体系在63 ℃反应温度、45 min孵育时间、16 U/管 Bst DNA聚合酶、4.0 mmol/L Mg2+、2.0 mmol/L dNTPs和1.2 mol/L甜菜碱条件下可获得最佳扩增效率与特异性。在生鲜牛奶、肉制品和果蔬制品3类样品的检测中,IMSA方法与PCR方法的阳性符合率和阴性符合率均达100%,Kappa值均为1.00（P<0.01）,表明2种检测方法对3类样品中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的检测结果完全一致。基于IMSA方法的金黄色葡萄球菌快速检测方法在食品检测中具有高特异性、高灵敏度和良好的实用性,为食品安全检测提供了一种高效、可靠的手段。

关键词：食品,金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus),等温多自配引发扩增（IMSA）方法,优化,应用

基金资助：四川省重点实验室基金项目（NJ2024-04）