基于流式细胞仪分析的花魔芋倍性检测条件筛选

来源：湖北农业科学杂志2026年第1期北京时间：

作者：吕恋心1,2, 焦盈盈1,2, 张诗婉1,2, 李晓倩1,2, 刘淼1,2, 何斐1,2

单位：1.富硒魔芋陕西省高校工程研究中心,陕西 安康 725000; 2.安康学院现代农业与生物科技学院,陕西 安康 725000

摘要：以花魔芋(Amorphophallus konjac K. Koch)新鲜愈伤组织为材料,比较解离缓冲液、荧光染色剂、过滤次数和离心处理对倍性检测结果的影响。结果表明,MGb解离缓冲液处理的花魔芋细胞核数量明显高于MgSO4和Tris-MgCl2处理组,且主峰明显,碎片峰较少,CV为4.47%。荧光染色剂DAPI与PI相比,染色效果无明显差异,但DAPI无需加入RNAase即可减少荧光噪音产生的背景干扰,节省检测时间。1次过滤法和2次过滤法都可以有效去除黏连细胞和细胞碎片,2次过滤法收集到的细胞核数量更多,效果更好。在制备细胞核悬浮液时,过滤后直接避光染色上机的检测效果最佳。研究初步建立的花魔芋流式细胞术倍性分析方法为取0.25 g花魔芋新鲜愈伤组织,加入1 mL MGb解离缓冲液,混合切碎,过滤后加入50 μL DAPI染色剂避光染色30 min即可上机检测。

关键词：花魔芋(AmorphophalluskonjacK.Koch),流式细胞仪,倍性检测

基金资助：陕西省科技厅项目(2025-JC-QN-1597; 2025NC-YBXM-029); 国家级大学生创新创业重点项目(202411397001)