《华北农学报杂志》发表论文赏析
作者:王茜, 宋玛丽, 杜军, 付月君, 胡风云, 梁爱华
单位:1. 山西大学 生物技术研究所, 化学生物学与分子工程教育部重点实验室, 山西 太原 030006;;2. 山西省人民医院 神经内科, 山西 太原 030012
摘要:为探讨N-糖基化对植酸酶phy(QF)酶学性质的影响,将植酸酶基因 phy(QF) 在毕赤酵母中进行了表达,利用脱糖基化酶Endo Hf去除重组植酸酶phy(QF)的糖链,对去除糖链前后的植酸酶phy(QF)进行了纯化和酶学性质研究与比较。结果表明,糖基化的植酸酶phy(QF)分子量约为53 kDa,酶活为3 201 U/mg,Km=392 μmol/L,Vmax=3 267 U/mg;糖基化的植酸酶phy(QF)最适pH值为4.5,最适反应温度为55 ℃,与去糖基化的植酸酶phy(QF)的最适pH值无明显区别,比去糖基化的植酸酶phy(QF)最适温度提高了5 ℃,Tm值提高约2 ℃。经70 ℃孵育10 min后,去糖基化的植酸酶phy(QF)完全失活,而糖基化的植酸酶phy(QF)仍残留13%的活性,说明N-糖基化作为一种重要的翻译后修饰,对植酸酶phy(QF)的稳定性有促进作用。
关键词:植酸酶,N-糖基化,毕赤酵母,热稳定性,圆二色谱,
基金资助:国家自然科学基金项目(31372199;31272100);国家高技术研究发展计划"863"计划项目(2012AA020809);山西省回国留学人员科研资助项目(2012-重点1)