拟南芥抗病相关基因T1N6_22的原核表达分析

来源：华北农学报杂志2015年第1期北京时间：

作者：蒋琛茜, 瓮巧云, 樊锦涛, 王冠宇, 董丽萍, 邢继红, 董金皋

单位：1. 河北农业大学, 真菌毒素与植物分子病理学实验室, 河北 保定 071001;；2. 河北北方学院 农林科技学院, 河北 张家口 075000

摘要：为构建拟南芥抗病相关 T1N6_22 基因的原核表达载体并进行高效表达,获得纯化的T1N6_22蛋白,以拟南芥Col-0的cDNA为模板,扩增获得了 T1N6_22 基因CDS,对其进行克隆、测序后与含有GST标签蛋白的pGEX4T-1载体相连,构建 T1N6_22 的原核表达载体pGEX4T-1- T1N6_22 -GST。经酶切和测序鉴定正确后,将构建好的载体及空载体转化大肠杆菌BL21。结果表明,在大肠杆菌BL21菌株中成功表达了与标签蛋白融合的T1N6_22蛋白,大小约57 kDa。SDS-PAGE分析表明,高效表达的诱导条件为0.1 mmol/L IPTG诱导培养3 h。研究结果为进一步T1N6_22互作蛋白的筛选及其调控拟南芥抗病分子机制的研究奠定了基础。

关键词：拟南芥,<em>T1N6_22</em>,原核表达,纯化,

基金资助：国家自然科学基金项目(31200203);河北省自然科学基金项目(C2012204032;C2014405010);高等学校博士学科点专项科研基金项目(20121302120007)