种子中特异表达IPT基因的植物双元载体构建及转基因水稻获得

来源：华北农学报杂志2015年第1期北京时间：

作者：张红心, 王桂兰, 陈超, 赵璞, 马春红

单位：1. 唐山师范学院 生命科学系, 河北 唐山 063000;；2. 厦门大学 生命科学学院, 福建 厦门 361005;；3. 河北省农林科学院 遗传生理研究所, 河北省植物转基因中心, 河北 石家庄 050051

摘要：为研究细胞分裂素在水稻籽粒发育中的作用,构建了p1300- pPG-5α-IPT-Nos 植物表达载体,并对水稻进行遗传转化。以水稻品种9311为材料,采用PCR法获得种子中特异表达的 PG-5α 基因启动子,并将此启动子与p1300相连接,构建p1300- pPG-5α 载体,用 Nco Ⅰ和 Spe Ⅰ双酶切pSG516,获得 IPT-Nos 核酸片段,然后将此核酸片段插入到p1300- pPG-5α 中,构建p1300- pPG-5α-IPT-Nos 植物表达载体。以水稻品种日本晴愈伤组织为材料,采用农杆菌介导的方法进行遗传转化。成功构建了植物表达载体p1300- pPG-5α-IPT-Nos,获得了阳性率为81.3%转 IPT 基因群体。获得转基因株系后,将为进一步筛选高效表达株系及观察其籽粒生长发育过程提供基础。

关键词：<em>PG-5&alpha;</em> 启动子,<em>IPT</em>,p1300-<em> pPG-5&alpha;-IPT-Nos</em>,水稻,遗传转化,

基金资助：唐山师范学院博士基金项目(09A01);农业部"948"项目(2011-G1(3)-07);河北省科技计划项目(13396401D)