青花菜BoPGIP1基因的原核表达及其重组大肠杆菌的抗逆性分析

来源：华北农学报杂志2015年第1期北京时间：

作者：张弢

单位：青岛农业大学 生命科学学院, 山东省高校植物生物技术重点实验室, 山东 青岛 266109

摘要：为进一步验证青花菜 BoPGIPl 基因的功能,通过RT-PCR方法克隆得到青花菜 BoPGIP1 基因完整的编码区序列,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达 BoPGIP1 基因的重组大肠杆菌BL21(pET28a- BoPGIP1),重组菌经IPTG诱导表达以及SDS-PAGE电泳检测,结果表明,在37 kDa处有一条特异表达的蛋白质条带,与预期的目的产物大小一致;同时对重组大肠杆菌BL21(pET28a- BoPGIP1)的抗逆性进行分析,结果表明,BL21(pET28a- BoPGIP1)对NaCl(0.4 mol/L)、NaHCO3(0.2 mol/L)和PEG6000(20%)的抗性明显高于对照菌株BL21(pET28a),该抗性的证明为 BoPGIP1 基因在植物抗逆基因工程中的应用提供了理论依据。

关键词：青花菜,<i>BoPGIP1</i>,原核表达,抗性分析,

基金资助：国家自然科学基金项目(31101556)