食用向日葵SSR-PCR反应体系的优化

来源：华北农学报杂志2015年第2期北京时间：

作者：胡小利, 马庆, 包海柱, 范瑞, 孙希利, 马蓉

单位：1. 内蒙古农业大学 农学院, 内蒙古 呼和浩特 010019;；2. 内蒙古农牧业科学院, 内蒙古 呼和浩特 010031

摘要：为建立食用向日葵分子标记反应体系,以食用向日葵四叶期叶片为DNA模板提取材料,采用单因素试验和正交试验设计,对SSR-PCR反应体系中的6因素(10×PCR Buffer、Mg2+ 、dNTPs、引物、 Taq DNA 聚合酶和DNA模板)在5水平上进行正交优化试验,并比较了不同浓度Mg2+、 Taq DNA聚合酶、模板DNA对扩增效果的影响,结果表明,各因素水平变化对反应体系的影响为Mg2+ > Taq DNA 聚合酶(引物)>DNA模板>10×PCR Buffer>dNTPs。最终建立食用向日葵SSR-PCR 最佳反应体系为:在总体系为20 μL的SSR-PCR反应体系中包括10×PCR Buffer 0.2 mmol/L、Mg2+2.0 mmol/L、dNTPs 1.8 mmol/L、Taq DNA聚合酶 0.2 U、DNA 50 ng、引物1.5 mmol/L。

关键词：食用向日葵,SSR-PCR,体系优化,

基金资助：内蒙古自然科学基金项目(2010MS0308)