农杆菌介导的ACO反义基因对铁皮石斛的遗传转化

来源：华北农学报杂志2015年第2期北京时间：

作者：武荣花, 康莹莹, 王洁琼, 刘佳, 崔波, 蒋素华, 张开明

单位：1. 河南农业大学 林学院, 河南 郑州 450002;；2. 河南农业大学 生命科学学院, 河南 郑州 450002;；3. 郑州师范学院 生物工程研究所, 河南 郑州 450044

摘要：以铁皮石斛原球茎为受体,用农杆菌介导1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO)的反义基因对铁皮石斛进行遗传转化,并对影响转化的几个因素进行优化,结果表明:经刀切法处理的原球茎,在AS浓度为100 μmol/L、农杆菌菌液OD600值为0.8的条件下侵染30 min,共培养60 h,接种到含有30 mg/L Mer 和3.0 mg/L PPT的筛选培养基中,遗传转化效率最高。筛选获得的抗性植株经GUS组织化学染色和PCR鉴定,初步证明ACO反义基因已整合到铁皮石斛的基因组中。

关键词：铁皮石斛,ACC氧化酶,遗传转化,根癌农杆菌,

基金资助：国家自然科学基金项目(31101562);河南省高等学校重点科研项目(15A220006)