小鼠骨形成蛋白BMP3的原核表达及多克隆抗体制备与鉴定

来源：华北农学报杂志2015年第3期北京时间：

作者：刘祥

单位：陕西理工学院 生物科学与工程学院, 陕西 汉中 723001

摘要：为构建小鼠BMP3蛋白原核表达载体,纯化BMP3蛋白,制备并鉴定BMP3蛋白小鼠多克隆抗体,以及对BMP3进行系统进化关系研究。采用RT-PCR 方法从小鼠肝脏中克隆获得BMP3蛋白的表达菌株;利用SDS-PAGE电泳切胶纯化、尿素梯度复性获得BMP3蛋白,免疫小鼠制备BMP3蛋白多克隆抗体;采用ELISA法检测抗体滴度达1: 3 200倍,Western Blotting证实抗血清具有很好的特异性。通过DNAMAN软件对BMP3序列同源性分析发现其C-端在不同动物间存在较高同源性;MEGA 软件对BMP3序列的系统发生分析证实BMP3在动物间具有明显的进化趋势。为BMP3蛋白调控骨代谢及与肿瘤的关系研究奠定基础。

关键词：BMP3蛋白,RT-PCR,多克隆抗体,ELISA,Western Blotting,

基金资助：陕西省教育厅科学研究计划项目(2013JK0723);陕西理工学院人才启动项目(SLGQD13-15)