与蓖麻种子大小性状连锁的RAPD分析

来源：华北农学报杂志2015年第5期北京时间：

作者：包春光, 黄凤兰, 朱国立, 刘浩, 杜娟, 彭木, 陈晓凤, 赵永

单位：1. 内蒙古民族大学 农学院, 内蒙古 通辽 028000;；2. 通辽市农畜产品质量安全中心, 内蒙古 通辽 028000;；3. 内蒙古民族大学 生命科学学院, 内蒙古 通辽 028000;；4. 内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术研究中心, 内蒙古 通辽 028000;；5. 通辽市农业科学研究院, 内蒙古 通辽 028000;；6. 东北林业大学 生命科学学院, 黑龙江 哈尔滨 150040

摘要：蓖麻种子大小因品种不同差异很大,目前尚未见与蓖麻种子大小性状发育相关的分子生物学研究。以32个不同大小的蓖麻种子作为研究材料,用U25(55)均匀试验设计法对种子大小性状的RAPD-PCR反应体系和条件进行优化。最佳反应体系为:25 μL体系中10×Buffer 2.7 μL、dNTP 2.4 μL、Mg2+ 2.4 μL、DNA 1.7 μL、引物 1.9 μL、 Taq polymerase 2.0 μL、ddH2O 11.9 μL。最佳反应条件为:94 ℃ 150 s;94 ℃ 45 s,39 ℃ 65 s,72 ℃ 90 s,35个循环;72 ℃ 10 min;4 ℃ 保存。用SB-002引物(碱基序列(5'-3'):TGCCGAGCTG),采用最佳的反应体系和条件在最大粒蓖麻种子中筛选到一个差异条带,测序结果在NCBI中进行比对,发现与高产粳稻基因组DNA、mRNA或cDNA同源性达到100%,因此推断所获差异条带与蓖麻种子产量有关,为蓖麻种子大小性状相关分子机理研究奠定了基础。

关键词：蓖麻,种子,大小,RAPD,

基金资助：国家自然科学基金项目(30760123;31160290);国家农业部公益性行业(农业)科研专项(201003057);内蒙古自治区高等学校“青年科技英才支持计划”(NJYT-14-A10);市校合作项目(SXZD2012018);内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术研究中心开放基金项目(BMYJ2011009)