长叶红砂黄烷酮-3-羟基转移酶3基因(RtF3H3)的克隆、表达分析及酵母表达载体的构建

来源：华北农学报杂志2015年第5期北京时间：

作者：张慧荣, 赵萍萍, 冯杰, 王迎春, 郑琳琳

单位：内蒙古大学 生命科学学院, 内蒙古 呼和浩特 010021

摘要：黄烷酮-3-羟基转移酶(F3H)是植物黄酮合成途径上游的一个关键酶,它催化黄烷酮C3位羟化,形成二氢黄酮醇。 构建长叶红砂 RtF3H3 基因酵母表达载体,为进一步研究 RtF3H3 基因功能奠定基础。基于高通量转录组测序结果,利用RT-PCR技术克隆获得长叶红砂 F3H3 (RtF3H3, GenBank登录号LC055546)基因,其开放阅读框长1 014 bp, 编码338个氨基酸,推测蛋白分子量为38.46 kDa,理论等电点为 5.7。通过定量RT-PCR研究发现, RtF3H3 在茎中表达量较高,在根和叶中表达量较低。不同程度NaCl(100,300,500 mmol/L)和不同时间UV(12,24,36 h)胁迫都能诱导 RtF3H3 基因表达量升高。另外,构建了 RtF3H3 基因酵母表达载体,为进一步研究 RtF3H3 基因功能奠定基础。

关键词：长叶红砂,<i>F3H</i>基因,定量RT-PCR,真核表达载体,

基金资助：国家自然基金项目(31360063);内蒙古自治区高等学校创新团队发展计划(NMGIRT1401)