转Cry1Ac-w基因抗虫玉米的获得及分子鉴定

来源：华北农学报杂志2015年第5期北京时间：

作者：燕树锋, 铁双贵, 岳润清, 韩小花, 齐建双, 卢彩霞

单位：河南省农业科学院 粮食作物研究所, 河南 郑州 450002

摘要：为将改造合成的抗虫基因(Cry1Ac-w)导入玉米基因组,以玉米杂交组合PA×PB的胚性愈伤组织为外植体,用双丙氨磷作为抗性愈伤组织的筛选剂,通过农杆菌介导法获得了82个再生植株。经标记基因(bar)和目的基因(Cry1Ac-w)的PCR检测,其中19株为阳性,即为推断的转 Cry1Ac-w 基因抗虫玉米。 对其中2株(w1和w2)进行目的基因单酶切的Southern杂交分析,发现w1和w2分别为单位点和双位点插入,这也进一步证实目的基因已经整合入玉米基因组中。用Bt-Cry1Ab/Ac金标免疫试纸条进行蛋白质表达的检测,初步证实目标Cry1Ac-w蛋白在玉米中得到表达。

关键词：玉米,农杆菌介导法,苏云金杆菌(Bt),<i>Cry1Ac-w</i>基因,Southern杂交,免疫检测,

基金资助：转基因生物新品种培育重大专项(2015ZX08011-003);河南省农业科学院自主创新专项基金项目