苦瓜几丁质酶的分离及生物学特征分析

来源：华北农学报杂志2015年第6期北京时间：

作者：朱新产, 王倩文, 于群

单位：青岛农业大学 生命科学学院, 山东省高校植物生物技术重点实验室, 山东 青岛 266109

摘要：为了探究苦瓜几丁质酶在生物防治和植物抗真菌病害中的潜势作用,以青皮苦瓜为试验材料,采用0~60%(NH4)2SO4分级分离苦瓜蛋白质,通过几丁质亲和柱层析色谱工作站,分步聚集纯化出几丁质酶.SDS-PAGE凝胶电泳显示单一条蛋白带;经生化分析鉴定,苦瓜几丁质酶的分子量为35.4 kDa,等电点pI=6.2;酶活力为24 U,比活力为32 U/mg.理化性检测表明,苦瓜几丁质酶的最适温度和pH值分别为50 ℃、6.0;氧化剂、还原剂和金属离子影响酶活力;其清除羟自由基能力和总抗氧化能力均有上升的趋势.抑菌试验显示,苦瓜几丁质酶对霉菌有一定的抑制效力,对植物致病真菌有不同程度的抑制作用,提示偏酸性几丁质酶具有明显的抗菌活性及抗氧化能力,利用区隔性分级提纯苦瓜几丁质酶,将能开发出有发展潜力的新型抗真菌病虫害药物.

关键词：苦瓜几丁质酶,分离纯化,SDS-PAGE,抑菌活性,

基金资助：山东省自然基金项目(ZR2011CM008)