西瓜根系蛋白质双向电泳体系的建立及优化

来源：华北农学报杂志2015年第S1期北京时间：

作者：张曼, 羊杏平, 徐锦华, 刘广, 姚协丰, 李苹芳

单位：江苏省农业科学院 蔬菜研究所, 江苏 南京 210014

摘要：为建立高效、稳定的西瓜根系蛋白质双向电泳技术体系,对西瓜根系蛋白质样品等电聚焦(IEF)条件、样品上样量、IPG胶条pH值范围、染色方法等参数进行优化.结果表明,采用TCA/丙酮法提取西瓜根系总蛋白,裂解液组 成为7 mol/L Urea、2 mol/L Thouirea、4% CHAPS(m/V)、1% Cocktail(V/V)、65 mmol/L DTT、2% pH值4~7 IPG Buffer, 上样量为800 μg,pH值4~7 IPG(13 cm)胶条、IEF条件为48 000 Vh,分离胶浓度为12.5%,CBB-R250染色时,可获得分辨率高、重复性好的双向电泳图谱,该技术条件为适合西瓜根系蛋白分离的较优双向电泳体系.

关键词：西瓜根系,蛋白质组,双向电泳,

基金资助：国家西甜瓜产业技术体系项目(CARS-NO.8);江苏省重大科技支撑计划项目(BE2012323)